堵”的原因之一:纯水中的---污染首先我们要认识到,一般的国产甲1醇其实不需要额外过滤处理,分离纯化,直接使用没有问题。即使是有些固态微粒杂质,也能在液相流路系统的过滤头上排除,真正容易引起问题的,是水中的---。新制备的纯水在室内放置几天就会长菌,而这些---虽然肉眼不可见,却---堵塞柱填料颗粒的空隙,造成柱子很快报废。这就是在配制流动相时造成的---污染的原因,解决它的方法很简单,就是---水的---性。
有两种方式:
(1)的方式当然是购买实验室---纯水机,既方便又---,也放心。缺点就是价格不菲。
(2)成箱购买市售纯净水,这些水的---应付液相色谱的要求。先随机抽取一支做一下---平板实验,待菌落数合格方可使用。这样每次只要单独开一支即可,也很方便。每次成本2元左右。这里------一个细节:在绝大多数书本上,凡谈到配制流动相都会谈到后一个过滤的步骤。但是从我们长期使用的实际效果来说,只要能---水的,这一步完全可以也应当去除。
如何预防液相色谱仪液相泵的故障: 要保持泵的---操作性能,必须维护系统的清洁,---溶剂和试剂的,对流动相进行过滤和脱气.下面列出预防泵故障的几项措施: 1、用高试剂和hplc级溶剂; 2、过滤流动相和溶剂; 3、脱气; 4、每天开始使用时放空排气,工作结束后从泵中洗去缓冲液; 5、不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中; 6、定期更换垫圈; 7、需要时加润滑油; 8、查阅有关泵操作手册中的其它建议。 处于---操作状态的泵,应该能使色谱图上的基线平稳;保留时间的重复性好。在等度洗脱时压力波动小于2%。梯度洗脱时压力变化应是缓慢和平稳的。 为了使故障发生后尽除,平时应常备密封、单向阀、泵头装置、各式接头、保险丝等部件,以及更换工具。
色谱法,又称层析法。根据其分离原理,有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同,用溶剂或气体洗脱,以使组分分离。常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚---等有吸附活性的物质。分配色谱是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同,以使组分分离。其中一相为液体,涂布或使之键合在固体载体上,称固定相;另一相为液体或气体,称流动相。常用的载体有硅胶、硅藻土、硅镁型吸附剂与纤维素粉等。离子交换色谱是利用被分离物质在离子交换树脂上的离子交换势不同而使组分分离。常用的有不同强度的阳、阴离子交换树脂,流动相一般为水或含有的缓冲液。排阻色谱又称凝胶色谱或凝胶渗透色谱,是利用被分离物质分子量大小的不同和在填料上渗透程度的不同,以使组分分离。常用的填料有分子筛、葡聚糖凝胶、微孔聚合物、微孔硅胶或玻璃珠等,可根据载体和试样的性质,选用水或为流动相。
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