超液相色谱仪的分类: 色谱分析法有很多种类,---同的角度出发可以有不同的分类方法。 从两相的状态分类: 色谱法中,流动相可以是气体,也可以是液体,由此可分为气相色谱法(gc)和液相色谱法(lc)。固定相既可以是固体,也可以是涂在固体上的液体,由此又可将气相色谱法和液相色谱法分为气-液色谱、气-固色谱、液-固色谱、液-液色谱。 另外,还有一种超临界流体色谱法,超临界流体色谱是值用超临界流体做流通相,以固体吸附剂(如硅胶)或键合到载体(或毛细管壁)上的高聚物为固定相的色谱法。超临界流体是在高于临界压力和临界温度时的一种物质状态,它既不是气体也不是液体,但兼有气体和液体的某些性质。
液相色谱系统提高了hplc的分离度、灵敏度、速度、精度和---性;---的并联泵头及单向阀设计理念,融合了当今上---的制造应用经验,使得用户在各种使用条件下都可以---输液的精度、脉动等性能指标,具备小系统死体积,工作能力可获得的提高。 液相色谱系统的原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。使用外力使含有样品的流动相(气体、液体)通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时,混合物中的各组分与固定相发生相互作用。
反相色谱影响因素(1)柱长有机小分子和肽类的分辨率随柱长的增加而增加.但是柱长增加并不能使蛋白质和---等生物大分子的分辨率---增加.它们在较短的柱子上往往也有---的分离效果。(2)流动相的流速。有机小分子和肽类的分辨率对流动相流速非常敏感。而蛋白质和---等生物大分子的分辨率则不然。流速越小,柱子越长,色谱峰的宽度就越大,分辨率就越小。制备色谱上样过程中的流速对动态吸附容量影响很大。(3)温度。温度上升,流动相黏度下降,流动速度加快,且流动相与固定相之间的传质速度加快,使分辨率增加。同时,温度上升,分子热运动增加,疏水性作用减弱。升高温度要考虑目标物质的热稳定性。(4)流动相组成。流动相的极性越大,溶质的分配系数越大,洗脱时间越长。rpc多采用降低流动相极性(水含量)的线性梯度洗脱法。水是极性强的溶剂,层析泵,在反相色谱中常常和基础溶剂配合使用,向流动相中加入不同浓度的、可以与水混溶的有机溶1剂,以得到不同强度的流动相,这些有机溶1剂称为修饰剂。反相色谱中的有机溶1剂。此外,---、---呋1喃、---1醇及二氧六环也常被用作修饰剂。有机溶1剂梯度的大小也会影响分辨率,一般梯度越小,分辨率越大。
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