液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相，称为---液相色谱法，此方法柱效低、时间长(常有几个小时)。液相色谱法(high performance liquid chromatography，hplc)是在---液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。也称现代液相色谱。
hplc的特点和优点
hplc有以下特点：
高压—压力可达150~300kg/cm2。色谱柱每米为75 kg/cm2以上。
高速—流速为0.1~10.0 ml/min。
—可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。
高灵敏度—紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。
随着柱填料的快速发展，反相色谱法的应用范围逐渐扩大，现已应用于某些无机样品或易解离样品的分析。为控制样品在分析过程的解离，常用缓冲液控制流动相的ph值。但需要注意的是，c18和c8使用的ph值通常为2.5~7.5(2~8)，太高的ph值会使硅胶溶解，太低的ph值会使键合的脱落。有报告新商品柱可在ph 1.5~10范围操作。
正相色谱法与反相色谱法比较表
正相色谱法 反相色谱法
固定相极性 高～中 中～低
流动相极性 低～中 中～高
组分洗脱次序 极性小先洗出 极性大先洗出
液相色谱仪在使用过程中难免会接触到腐蚀性的物质。这些腐蚀性物质不论是气体、液体还是固体，都有可能损坏仪器的材料和零部件，降低色谱仪的使用寿命。在使用时要尽量避免这种情况的出现。 液相色谱仪流动相类型有多种，高压液相色谱仪，流动相性质对样品的分离影响很大。
液相色谱仪流动相类型： 1、按组成可分：单组分流动相和多组分流动相。 2、按极性可分：极性流动相、弱极性流动相和非极性流动相。 3、按作用可分：底剂和洗脱剂。 4、按使用方式可分：等度流动相和梯度流动相。 5、按用途可分：---、乙1酸乙1酯、---、乙1腈和水等。 采用二元或多元组合溶剂作为流动相，可以灵活调节流动相的极性和增加选择性，改进分离和调整出峰时间。
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