国产液相色谱仪借助于hplc(液相色谱)的理论及原理,涵盖了小颗粒填料、低系统体积、耐高压及快速检测手段等全新技术,增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。 国产液相色谱仪的应用范围: 可分析极性、弱极性或非极性的有机化合物,热稳定性差的化合物以及具有生物活性的生物分子。广泛应用于---、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、、人体代谢产物、表面活性剂、杀虫剂、除莠剂等物质的定性和定量分析。例如、多环芳香化合物、甾体化合物、、色素、防腐剂、有机酸、---、糖类、蛋白质、---酸、肽、酶等,还可进行样品的纯化、手性的拆分等。
反相色谱(rpc)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶1剂的水溶液为流动相,根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。与hic一样,rpc中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面,但是,rpc固定相表面完全被非极性基团所覆盖,表现出---的疏水性。因此,必须用极性有机溶1剂或其水溶液进行溶质的洗脱分离。溶质在反相介质上的分配系数取决于溶质的疏水性,一般疏水性越大,分配系数越大。当固定相一定时,可以通过调节流动相的组成调整溶质的分配系数。rpc主要应用于相对分子低于5000,---是1000以下的非极性小分子物质的分析和纯化,也可以用于蛋白质等生物大分子的分析和纯化。由于反相介质表面为---疏水性,并且流动相为低极性的有机溶1剂,生物活性大分子在rpc分离过程中容易变性失活,所以,以回收生物活性蛋白质为目的时,应注意选用适宜的反相介质。
色谱柱中的流动相会排干吗? 不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形:不慎未及时补充流动相,泵将溶剂瓶中的流动相吸干了,hplc系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱?泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了?色谱柱还能使用吗?事实上,如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干,并不会造成色谱柱的损坏。即使泵中充满了空气,制备液相,泵也不会将空气排入色谱柱。因为泵只能输送液体,而不能输送空气。相比之下,另一个更可能发生的情况是忘记盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。同样,整个色谱柱干涸的情况不太容易发生,多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了,因挥发掉所有溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间。即使色谱柱真的变干了,也不一定就不可救药了。可以尝---一种完全脱气的、表面张力低的溶剂冲洗色谱柱以除去气体。较低的表面张力有助于浸润填料表面;已脱气的溶剂应该能够溶解并去除滞留在填料中的气体。色谱柱大约需要冲一个小时或更多的时间被---浸润,恢复到正常状态。
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