基本原理液相色谱(high performance liquid chromatography,hplc),是在---液相色谱法的基础上,于20世纪60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。与---液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀。因为较小的填充颗粒具有高柱效,但会引起高阻力,需用高压输送流动相,故又称高压液相色谱。使用液相色谱时,液体待检测物被注入色谱柱,通过压力在固定相中移动,由于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同,不同的物质顺序离开色谱柱,通过检测器得到不同的峰信号,后通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。液相色谱作为一种重要的分析方法,液相色谱,广泛地应用于化学和生化分析中。液相色谱从原理上与---的液相色谱没有本质的差别,它的特点是采用了高压输液泵、高灵敏度检测器和微粒固定相,适于分析高沸点不易挥发、分子量大、不同极性的有机化合物。
目前连续色谱分离技术已经实现成熟的工业化,除了实际的移动床可以实现以外,还有另一种模拟移动床可以运用,目前我司工业化的为septot cr 模拟系统,其主要原理就是采用一个电磁阀组模拟移动床的实际切换树脂柱的效果,即树脂柱不动,而进出料口通过程序控制阀门,使进料和出料到相应的树脂柱时打开或关闭。
根据流动相和固定相相对极性不同,液相色谱分为正相色谱和反相色谱。流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。在现代液相色谱中应用广泛,现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。
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溶解度水溶性样品离子交换色谱法和液液分配色谱法;微溶于水,但在酸或碱存在下能---电离的化合物,也可用离子交换色谱法;油溶性样品或相对非极性的混合物,可用液-固色谱法。化学结构若样品中包含离子型或可离子化的化合物,或者能与离子型化合物相互作用的化合物(例如配位体及有机螯合剂),可首先考虑用离子交换色谱,但空间排阻和液液分配色谱也都能顺利地应用于离子化合物;异构体的分离可用液固色谱法;具有不同---团的化合物、同系物可用液液分配色谱法;对于高分子聚合物,可用空间排阻色谱法。
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