中压液相色谱(mplc)柱压在5-20bar(或75-300psi)之间,广泛用于实验室和工业规模的生物制品(如动物脏器提取液、浓缩液、---、植物提取液、生物技术发酵液等--往往需要经过滤膜作初级净化)的处理,以提取或纯化所需的产品。 高压液相色谱(hplc)是指柱压一般大于20bar(或300psi)的“高压(或)液相色谱”,通常指所用色谱柱的塔板数大于2000,一般是在2,000~20,000的范围之间。
液相色谱仪的常规操作及维修: 1、过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。 2、对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。 3、打开hplc工作站,连接好流动相管道,连接检测系统。 4、进入hplc控制界面主菜单,---manual,进入手动菜单。 5、有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,需要在manual菜单下,先---purge,再---start,冲洗时速度不要超过10ml/min。 6、调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000。---injure,选用合适的流速,---on,走基线,观察基线的情况。 7、设计走样方法。---file,选取se-lectusersandmethods,可以选有的各种走样方法。若需建立一个新的方法,---newmethod。选取需要的配件,包括进样阀,分离纯化,泵,检测器等,根据需要而不同。选完后,---protocol。一个完整的走样方法需要包括:a、进样前的稳流,一般2-5分钟;b、基线归零;c、进样阀的loading-inject转换;d、走样时间,随不同的样品而不同。 8、进样和进样后操作。选定走样方法,---start。进样,所有的样品均需过滤。方法走完后,---trun,可记录数据和做标记等。全部样品走完后,再用上面的方法走一段基线,洗掉剩余物。 9、关机时,先关计算机,再关液相色谱。
国产液相色谱仪借助于hplc(液相色谱)的理论及原理,涵盖了小颗粒填料、低系统体积、耐高压及快速检测手段等全新技术,增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。 国产液相色谱仪的应用范围: 可分析极性、弱极性或非极性的有机化合物,热稳定性差的化合物以及具有生物活性的生物分子。广泛应用于---、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、、人体代谢产物、表面活性剂、杀虫剂、除莠剂等物质的定性和定量分析。例如、多环芳香化合物、甾体化合物、、色素、防腐剂、有机酸、---、糖类、蛋白质、---酸、肽、酶等,还可进行样品的纯化、手性的拆分等。
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