色谱柱是hplc系统非常关键的一部分,随着色谱技术的发展,它也不断地更新换代,长度变得越来越短,填料颗粒也越来越细。现在常用的色谱柱长度在30~250 mm,颗粒直径在1.6~5μm。颗粒类型主要有全多孔和表面多孔,全多孔填料具有的柱容量、更多键合相选择的优点,表面多孔具有反压低、峰形好的优点。的基质是硅胶。以前填料纯化技术不是很成熟,十八烷基键合到硅胶表面不是很完全,硅胶上总是少量的硅---在外面。这样就造成样品在进行色谱分离的时候,会吸附或者键合在这部分硅---上,导致色谱峰拖尾。使用三---作为封尾剂,与硅---吸附,可以使峰型---,这个三---曾经一度成为分析界的宝贝和。现在,制造填料的技术日趋成熟,液相分离,人们已经掌握了把这部分剩余未键合硅胶也进行键合钝化的技术,这个技术就叫作封尾。
将色谱柱的出口端插入装有---的样品瓶中,正常情况下,我们可以看见瓶中稳定持续的气泡。如果没有气泡,就要重新检查一气装置和流量控制器等是否正确设置,并检查一下整个气路有无泄漏。等所有问题解决后,将色谱柱出口从瓶中取出,---柱端口无溶剂残留,再进行下一步的安装。 将色谱柱连接于检测器上其安装和所需注意的事项与色谱柱与进样口连接大致相同。如果在应用中系统所使用的是ecd或npd等,那么在老化色谱柱时,应该将柱子与检测器断开,这样检测器可能会更快达到稳定。确定载气流量,再对色谱柱的安装进行检查注意:如果不通入载气就对色谱柱进行加热,会快速且性的损坏色谱柱。 色谱柱的老化色谱柱安装和系统检漏工作完成后,就可以对色谱柱进行老化了。
液相色谱仪在使用过程中难免会接触到腐蚀性的物质。这些腐蚀性物质不论是气体、液体还是固体,都有可能损坏仪器的材料和零部件,降低色谱仪的使用寿命。在使用时要尽量避免这种情况的出现。 液相色谱仪流动相类型有多种,流动相性质对样品的分离影响很大。
液相色谱仪流动相类型: 1、按组成可分:单组分流动相和多组分流动相。 2、按极性可分:极性流动相、弱极性流动相和非极性流动相。 3、按作用可分:底剂和洗脱剂。 4、按使用方式可分:等度流动相和梯度流动相。 5、按用途可分:---、乙1酸乙1酯、---、乙1腈和水等。 采用二元或多元组合溶剂作为流动相,可以灵活调节流动相的极性和增加选择性,改进分离和调整出峰时间。
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