色谱法的应用可以根据目的分为制备性色谱和分析性色谱两大类。制备性色谱的目的是分离混合物,获得一定数量的纯净组分,这包括对有机合成产物的纯化、天然产物的分离纯化以及去离子水的制备等。相对于色谱法出现之前的纯化分离技术如重结晶,色谱法能够在一步操作之内完成对混合物的分离,但是色谱法分离纯化的产量有限,只适合于实验室应用。制备色谱到底是什么?(1)分析色谱的目的,是分析出混合物中一个(或者几个)纯物质的含量。制备色谱的目的,是从混合物中得到纯物质。为了加快分离的时间与提高分离的效率,制备色谱的的进样品量很大,导致制备色谱柱子的分离负荷的相应加大,也就必须加大色谱柱填料,增大制备色谱的直径和长度,使用的相对多的流动相。然而,当色谱柱上样品负载加大的时候,往往导致柱效急剧下降而得不到纯的产品。制备色谱,要解决容量与柱子效果之间的矛盾,对重现性也要考虑。从经济上来说。制备色谱要争取少用填料,少用溶剂,要尽可能多的得到产品。(2)样品的前处理:制备色谱柱子由于处理的样品多,比分析柱子更容易受污染,所以,---的前处理就显得非常的---。萃取、过滤、结晶、固相萃取等简单的分离方法,如果用得上,而且还不是很麻烦,就要尽可能多的采用以去掉杂质。(3)固定相的选择硅胶、键合固定相(如c18)、离子交换树脂、聚---、氧化铝、凝胶等都可以作为色谱柱的填料。 有不少文献---,对填料可以进行一下处理提高了分离效果,如,对硅胶进行的(或缓冲液)处理。
国产液相色谱仪的特点: 1、速分析: 的耐压水平:140mpa,可真正实现速分析。因系统耐压增强,有些会导致压力升高的流动相也可使用,这样扩大了可选分析方法的范围,非常适合复杂成分的检测和分析方法的开发。 2、高分辨分析: 新开发的色谱柱,理论塔板数---50,000以上,耐压---140mpa,实现了真正的分辨分析。 新型二元泵配有冲程可变独立柱塞,除了日立特有的lbt*1技术,还标配低容量双螺纹混合器,这些都---送液时的混合效果和稳定性---。 10mm全反射型毛细管流通池,可有效减小柱外扩散,分离纯化,获得更高分辨。 3、高灵敏度分析: 二极管阵列检测器的65mm流通池,灵敏度---,对痕量物质的检测尤为---。 二极管阵列(dad)检测器的新型光学系统有效地减小了噪音和漂移,---了高灵敏度的分析结果。 自动进样器配有多种清洗模式,标配进样口反冲功能,---降低了样品残留。
制备液相色谱仪的功能: 泵形式:串联双柱塞浮动式密封圈。 泵头自冲洗功能。 “自吸式单向阀”技术,可延长密封圈使用寿命。 程序化的溶剂类和压缩因子,可自动补偿。 完整的预清洗功能,更于快速溶剂更换。 制备液相色谱仪主要用于以下领域: 1、天然化学、中药化学:这是国内目前广泛的使用方法,为了弄清楚植物中的微量有效成分,开放手工色谱柱早已不够用了,几乎每个搞天然药化的实验室都至少有一台液相,土豪实验室人手一台液相。 2、蛋白纯化:相对于前者,蛋白纯化的起步要稍微晚一点,但是发展很迅速。同时,由于外国仪器厂家在这个领域的优势不算太大,目前国内也在这个领域加快发展,抢占地盘。 3、杂质纯化:由于合成工艺并不能做到100%的产率,往往伴有副产品,如何获得微量的杂质并确定结构和含量,这就得靠液相色谱。 4、手性化合物的制备:这个主要是有机合成和方法学的在用。
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