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    2020-9-26

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色谱分离原理

液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。

1.液固色谱法 使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱---离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。分离过程是一个吸附-解吸附的平衡过程。常用的吸附剂为硅胶或氧化铝,粒度5~10μm。适用于分离分子量200~1000的组分,大多数用于非离子型化合物,离子型化合物易产生拖尾。常用于分离同分异构体。

2.液液色谱法 使用将特定的液态物质涂于担体表面,或化学键合于担体表面而形成的固定相,分离原理是根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离。分离过程是一个分配平衡过程。

涂布式固定相应具有---的惰性;流动相必须预先用固定相饱和,以减少固定相从担体表面流失;温度的变化和不同批号流动相的区别常引起柱子的变化;另外在流动相中存在的固定相也使样品的分离和收集复杂化。由于涂布式固定相很难避免固定液流失,现在已很少采用。现在多采用的是化学键合固定相,如c18、c8、---柱、基柱和柱。





液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相,称为---液相色谱法,此方法柱效低、时间长(常有几个小时)。液相色谱法(high performance liquid chromatography,hplc)是在---液相色谱法的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。也称现代液相色谱。

hplc的特点和优点

hplc有以下特点:

高压—压力可达150~300kg/cm2。色谱柱每米为75 kg/cm2以上。

高速—流速为0.1~10.0 ml/min。

—可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。

高灵敏度—紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。








购买的小技巧:  液相色谱仪等分析仪器都有相应的指标,所以我们购买液相色谱仪一定先看是否满足标准,在选择厂家以及型号方面多做对比,才能选择出适合自己使用且---的仪器。液相色谱仪的指标比较多,包括检测器的、泵的等等,他的主要指标有漂移、定性定量重复性、小检测浓度和噪音,下面我们就看看这几项的选择。  我们先看漂移的指标,我们首先需要了解什么是漂移,漂移是指仪器稳定后一段时间内基线漂离---的距离,分离纯化,通常用来衡量仪器稳定快慢,好的仪器会在很短时间就能稳定,提高分析效率。定性定量重复性主要是考核仪器稳定性的指标,这对于分析样品来说是非常重要的,好的仪器其稳定性应该是十分的。小检测浓度是和噪音成正比的,噪音越大,小检测浓度就越大,灵敏度就越低,某些厂家回避了这个指标,说明他们不愿在小检测浓度的基础上去比较噪音。对于检测低含量的样品就要求仪器的噪音越小越好,否则噪音过大将会导致基线不稳,甚至影响分析结噪音的大小直接关系到仪器的检测灵敏度,噪音越大,检测的灵敏度就越低。
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