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    2020-9-25

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色谱又称色层法或层析法,是一种物理化学分析方法,它利用不同溶质(样品)与固定相和流动相之间的作用力(分配、吸附、离子交换等)的差别,高压制备,当两相做相对移动时,各溶质在两相间进行多次平衡,使各溶质达到相互分离。1906年tswett 研究植---素分离时提---谱法概念;他在研究植物叶的色素成分时,将植色谱物叶子的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管内,然后加入使其自由流下,结果色素中各组分互相分离形成各种不同颜色的谱带。按光谱的命名方式,这种方法因此得名为色谱法。以后此法逐渐应用于无色物质的分离,“色谱”二字虽已失去原来的含义,但仍被人们沿用至今。在色谱法中,静止不动的一相(固体或液体)称为固定相(stationary phase) ;运动的一相(一般是气体或液体)称为流动相(mobile phase)。



色谱法分类

按两相的物理状态可分为:气相色谱法(gc)和液相色谱法(lc)。气相色谱法适用于分离挥发性化合物。gc根据固定相不同又可分为气固色谱法(gsc)和气液色谱法(glc),其中以glc应用广。液相色谱法适用于分离低挥发性或非挥发性、热稳定性差的物质。lc同样可分为液固色谱法(lsc)和液液色谱法(llc)。此外还有超临界流体色谱法(sfc),它以超临界流体(界于气体和液体之间的一种物相)为流动相(常用co2),因其扩散系数大,能很快达到平衡,故分析时间短,---适用于手性化合物的拆分。

按原理分为吸附色谱法(ac)、分配色谱法(dc)、离子交换色谱法(iec)、排阻色谱法(ec,又称分子筛、凝胶过滤(gfc)、凝胶渗透色谱法(gpc)和亲和色谱法。(此外还有电泳。)

按操作形式可分为纸色谱法(pc)、薄层色谱法(tlc)、柱色谱法。





柱色谱为向玻璃管中填入固定相,以流动相溶剂浸润后在上方倒入待分离的溶液,再滴加流动相,因为待分离物质对固定相的吸附力不同,吸附力大的固着不动或移动缓慢,吸附力小的被流动相溶剂洗下来随流动相向---动,从而实现分离。纸色谱以滤纸条为固定相,在纸条上点上待分离的混合溶液的样点,将纸条下端浸入流动相溶剂中悬挂,溶剂因为毛细作用沿滤纸条上升,样点中的溶质从而被分离。薄层色谱是在玻璃板上涂以固定相涂层,然后点样,下端浸入溶剂,同样自下而---离。常用于探索柱色谱实验条件,溶剂和固定相的选择等。常用固定相有石膏、氧化铝、蔗糖、淀粉等,常用流动相为水、等各种。



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