透明流路管:指的是在过滤头和输送泵之间的那一段管路。这一个部分往往不是有点气泡,而经常是整个管中全是空气而操作人员却浑然不知,以致输送泵工作了半天才发现流动相瓶里的液体一点也没少。这也是我们常说的液相色谱仪至少一周要开机一次的原因(我们做液相一定要有“微渗”的概论)。如果长时间不用,这一段管路的液体会---干掉,而充满空气的管路和充满液体的管路不仔细看是分辨不出来的。这种情况对于输送泵很危险,因为泵从设计来说是输送液体而不是输送气体,内部的液体对于活塞来说起到了机油的作用,如果活塞杆还残存了一些缓冲盐,则极易拉伤,造成不可逆转的影响。对于这种情况,要---“预防为主”如:液相色谱使用人员要相对固定和稳定,工作中合理搭源,每台机一周至少一次实验,如长期不用起码每周要冲流动相2小时。养成---的工作习惯很重要。
液相色谱仪的常规操作及维修: 1、过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。 2、对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。 3、打开hplc工作站,连接好流动相管道,连接检测系统。 4、进入hplc控制界面主菜单,---manual,进入手动菜单。 5、有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,需要在manual菜单下,先---purge,再---start,冲洗时速度不要超过10ml/min。 6、调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000。---injure,选用合适的流速,液相色谱,---on,走基线,观察基线的情况。 7、设计走样方法。---file,选取se-lectusersandmethods,可以选有的各种走样方法。若需建立一个新的方法,---newmethod。选取需要的配件,包括进样阀,泵,检测器等,根据需要而不同。选完后,---protocol。一个完整的走样方法需要包括:a、进样前的稳流,一般2-5分钟;b、基线归零;c、进样阀的loading-inject转换;d、走样时间,随不同的样品而不同。 8、进样和进样后操作。选定走样方法,---start。进样,所有的样品均需过滤。方法走完后,---trun,可记录数据和做标记等。全部样品走完后,再用上面的方法走一段基线,洗掉剩余物。 9、关机时,先关计算机,再关液相色谱。
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