如果流路管中真漏气了怎么办?
建议是用外力使管路中充满液体。
具体如下:
1、找到流路管进入输送泵的接头。
2、拧下来。
3、用一干净洗耳球的尖1端对准管路的平整切口。
4、吸液体,液相色谱,看液面从流动相瓶里上升,至离洗耳球5cm左右时停止该动作。
5、快速把接头拧回输送泵上(这个过程可能会有少许流动相---,这是正常现象)。
6、开机,开排液阀门,启动输送泵。
7、等排液管中流出的溶液没有气泡时,再关闭排液阀,仪器正常工作。
输送泵和柱子:这些部分进了气泡一般不怕,冲掉就行。
液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相,称为---液相色谱法,此方法柱效低、时间长(常有几个小时)。液相色谱法(high performance liquid chromatography,hplc)是在---液相色谱法的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。也称现代液相色谱。
hplc的特点和优点
hplc有以下特点:
高压—压力可达150~300kg/cm2。色谱柱每米为75 kg/cm2以上。
高速—流速为0.1~10.0 ml/min。
—可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。
高灵敏度—紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。
反相色谱影响因素(1)柱长有机小分子和肽类的分辨率随柱长的增加而增加.但是柱长增加并不能使蛋白质和---等生物大分子的分辨率---增加.它们在较短的柱子上往往也有---的分离效果。(2)流动相的流速。有机小分子和肽类的分辨率对流动相流速非常敏感。而蛋白质和---等生物大分子的分辨率则不然。流速越小,柱子越长,色谱峰的宽度就越大,分辨率就越小。制备色谱上样过程中的流速对动态吸附容量影响很大。(3)温度。温度上升,流动相黏度下降,流动速度加快,且流动相与固定相之间的传质速度加快,使分辨率增加。同时,温度上升,分子热运动增加,疏水性作用减弱。升高温度要考虑目标物质的热稳定性。(4)流动相组成。流动相的极性越大,溶质的分配系数越大,洗脱时间越长。rpc多采用降低流动相极性(水含量)的线性梯度洗脱法。水是极性强的溶剂,在反相色谱中常常和基础溶剂配合使用,向流动相中加入不同浓度的、可以与水混溶的有机溶1剂,以得到不同强度的流动相,这些有机溶1剂称为修饰剂。反相色谱中的有机溶1剂。此外,---、---呋1喃、---1醇及二氧六环也常被用作修饰剂。有机溶1剂梯度的大小也会影响分辨率,一般梯度越小,分辨率越大。
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