色谱柱中的流动相会排干吗？ 不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形：不慎未及时补充流动相，泵将溶剂瓶中的流动相吸干了，hplc系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱？泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了？色谱柱还能使用吗？事实上，如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干，并不会造成色谱柱的损坏。即使泵中充满了空气，泵也不会将空气排入色谱柱。因为泵只能输送液体，而不能输送空气。相比之下，另一个更可能发生的情况是忘记盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。同样，整个色谱柱干涸的情况不太容易发生，多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了，因挥发掉所有溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间。即使色谱柱真的变干了，也不一定就不可救药了。可以尝---一种完全脱气的、表面张力低的溶剂冲洗色谱柱以除去气体。较低的表面张力有助于浸润填料表面；已脱气的溶剂应该能够溶解并去除滞留在填料中的气体。色谱柱大约需要冲一个小时或更多的时间被---浸润，恢复到正常状态。
液相色谱仪的原理： 分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关，也与温度、压力有关。在不同的色谱分离机制中，k有不同的概念：吸附色谱法为吸附系数，离子交换色谱法为选择性系数（或称交换系数），凝胶色谱法为渗透参数。但一般情况可用分配系数来表示。 在条件（流动相、固定相、温度和压力等）一定，样品浓度很低时（cs、cm很小）时，k只取决于组分的性质，而与浓度无关。这只是理想状态下的色谱条件，在这种条件下，得到的色谱峰为正常峰；在许多情况下，随着浓度的增大，k减小，这时色谱峰为拖尾峰；而有时随着溶质浓度增大，k也增大，这时色谱峰为前延峰。因此，只有尽可能减少进样量，使组分在柱内浓度降低，k恒定时，才能获得正常峰。
制备液相色谱仪是近30年发展起来的一种具有高灵敏度、高选择性的快速分离分析技术。它既能用于微量组分的分析测定，又能用于大量的制备分离，灵活多样，其应用范围已超过其他各种分离方法，尤其在中药样品的分析分离方面更充分发挥它的特长，为推动该领域的进步和发展作出了---贡献。 根据用途和泵配置的不同，一般可以将常见的实验室级别lc分为以下几种：分析型液相色谱仪（hplc），半制备液相色谱仪(semi-prephplc)和制备型液相色谱仪（prep-hplc）以及中压液相色谱仪(mplc)。这三者的原理基本一样，分离纯化，不同之处主要在于泵的大流速，一般而言，分析型hplc的大流速为10.00ml/min，半制备hplc为50ml/min，制备hplc为100ml/min，中压液相色谱更高。而由于泵流速的升高，流通池的光程、体积，管道的内径，六通阀、定量环等零件也会相应改变；并且，根据实验室的需要，可以增加自动接收1器等配件。
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